角色名：约翰·米勒 演员：克里斯蒂安·贝尔

在片中的身份一开始并不是神父，而是一位入殓师，一个爱钱如命的酒鬼，只为负责给死去的英格曼神父化妆，才进入了教堂。但为了救助教堂里的学生，留了下来成为一名伪神父，他同时也收留了“金陵十三钗”（十三个青楼女子）。

角色名：玉墨 演员：倪妮

13个躲避战火的秦淮河上的风尘女子之一。当女学生们不甘被日军凌辱，准备集体自杀，被以玉墨为首的妓女们救下，成为了保护众人的英雄。

角色名：孟书娟 演员：张歆怡

教堂中女学生之一。父亲成为汉奸，面对同伴的质疑与嘲讽时，展现出坚定的一面。她还救了秦淮河的十三位妓女，在面对日军时，即使内心十分害怕，但却不胆怯。

角色名：陈乔治 演员：黄天元

前教堂神父的养子，也是这群学生中唯一的男生，所以担任起保护女学生安全的责任。在最后缺少一个女生的情况下，男扮女装和玉墨一行人去了日本人的“庆功宴”。

角色名：李教官 演员：佟大为

是一名中国军人，也是一个枪法高超的狙击手。率领十几名士兵，拼死守护着南京城。李军官在被敌军包围并且负伤的情况下，与日本士兵同归于尽，死于炸药之下。

角色名：长谷川大佐 演员：渡部笃郎

日军中的一名高级军官，要求女学生去日军庆功会表演。

角色名：孟先生 演员：曹可凡

孟书娟的爸爸，因为为日军作翻译，被南京人骂做汉奸。但他还冒着生命的危险，跟日军求来了通行证，帮助约翰和女儿一行人成功逃离南京，但自己死于日军的枪下。